如何用酶联免疫分析试剂盒做elisa

 时间:2024-11-05 11:33:33

相信很多同学在实验中都会接触到elisa的学习,对于新人来说,elisa的操作,其实非常的简单,今天给大家讲解如何用酶联免疫分析试剂盒做eliasa

工具/原料

酶标仪

37°C恒温箱

高精度加样器及枪头

样本

方法/步骤

1、标准品加样设置标准孔和样孔,各加不同浓度标准品,分别设空白孔,待测样品孔。在酶标腻戴怯猡包被版上待测样品孔中先加样品稀释液,再加待测样品。加样时尽量不触及孔壁

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2、加酶温育和配液每个孔加入酶标试剂,空白孔除外,用封板膜封板后置于37°C温育60分钟,而后配液,将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

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3、洗涤小心揭掉封板膜,丢弃掉液体,甩干,每个孔中加满洗涤液,静置30秒后丢弃掉,如此重复5次,每次清洗后都要拍干

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4、显色每个孔先加入显色剂A,而后加入显色剂B,轻轻的震荡混匀,37°C避光显色15分钟(可放在37°C恒温箱中进行避光处理)

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5、终止每个孔加终止夜,终止反应,此时可以看到液体的颜色由蓝色立马转为黄色,且黄色较淡,如图中所显示的颜色所示

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6、测定在加终止夜的15分钟以内,以空白孔凋零,450nm波长依序测量各孔的吸光度OD值,以钿泼兽匿标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘制标准曲线,就可进行计算了

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