制备动物基因组DNA的具体步骤

 时间:2024-10-18 09:26:19

最近小编收到很多问题,其中一个就是下面小编为大家整理一下关于的步骤,希望这些方法能够帮助到大家。

制备动物基因组DNA的具体步骤

方法/步骤

1、首先,取贴壁生长培养的细胞一瓶,除去培养基,用五毫升的冰的PBS洗一次,用胰酶进行消化,在四摄氏度1000r/min下离心十分钟。

制备动物基因组DNA的具体步骤

2、然后,取细胞沉淀添加十毫升的冰PBS,悬浮洗涤,在四摄氏度1000r/min下什置葆鸳离心十分钟,用细胞沉淀的10-40倍量的DNA抽提缓冲液约20ml悬浮细胞。

制备动物基因组DNA的具体步骤

3、然后,添加1/100倍体积的百分之十的SDS,再添加蛋白酶K,使其最后质量浓度为一百微克没毫升。

制备动物基因组DNA的具体步骤

4、然后,在五十五摄氏度下保温两个半小时,期间轻缓地倒转几次,用等量的苯酚/氯仿/异戊醇抽提进行轻柔的混匀。

制备动物基因组DNA的具体步骤

5、然后,在室温条件下,以3000r/min速率离心十分钟,将上清液移至新的离心管中,用等量的氯仿/异戊醇抽提,然后在重复刚刚的离心和转移新的离心管。

制备动物基因组DNA的具体步骤

6、然后,添加1/10体积的3mol/lNaAc以及2倍的冷乙醇,进行混匀在300廴类锾渭0r/min离心两分钟,沉淀用70%的冷乙醇清洗、离心、干燥,用1ml的TE缓冲液悬浮。

制备动物基因组DNA的具体步骤

7、最后,用电泳或者在260nm条件下测定光密度,计算DNA的含量,然后将其储存在4摄氏度的冰箱中。

制备动物基因组DNA的具体步骤

Word2019怎么显示标尺?Word2019标尺的使用方法 如何书面告知客户涨价 今年国际减灾日的主题是什么 电站锅炉设备及系统的概述? 怎样在excel中去设置仿宋字体呢?
热门搜索
icon图标 龙的图案图片大全 天线宝宝图片 少女日记 色系邪恶漫画军团