实验原理:小鼠精子形态受基因控制,许多常染色体及X,Y染色体上擢爻充种的基因都直接或间接地决定精子的形态。精子的畸吾疣璨普形是与精子生长发育有关的基因突变的结果。基因及其蛋白质的改变导致精子形态的改变。精子畸形实验可检测环境因子对雄性动物的遗传毒性。
工具/原料
实验动物及器材:眼科剪、擦镜纸、平皿、显微镜
实验试剂:环玲酰胺、生理盐水、甲醇、伊红染色
睾丸及附睾
1、睾丸的三种功能细胞:(1)睾丸婧旱恐笆支持细胞;(2)间质细胞:分泌雄性激素;(3)精原细胞:曲细精管生精过程睾丸的3种功能细胞中,以生精细胞对机体内外环境条件的改变最牾肟甘道为敏感,适应环境因素的弹性度较狭小,如温度、超声波、微波、电离辐射、磁场、药物、全身性疾病、内分泌、维生素、微量元素、烟、酒等物化生物因素,都会不同程度的干扰精子发生和生成。而支持细胞和间质细胞对这些因素的耐受力较高,影响较小。
2、附睾:(1)储存精子;(2)分泌附睾液,有助于精子成熟
实验步骤
1、1.染毒:CP腹腔注射(50mg/kg)一次,并于首次给药后35天处死动物。
2、2.取出二侧副睾,放入盛有2mL生理盐水的平皿中。用眼科剪将副睾纵向剪1~2刀,静止3~5min,轻轻摇动。用四层擦镜纸过滤,吸滤液涂片。
3、3.空气干燥后,用甲醇固定5min以上干燥。用1%~2%伊红染色1m,用水轻冲,干燥。
4、4.镜检:邋冠判厩低倍镜寻找精子重叠少的区域,高倍镜观察计数(结构完整的精子)。碎片或人为剪短者排除。每只动物计数1000个精子,计算精子畸形率(﹪)精子畸形:头部:无定形、香蕉头、胖头、双头尾部:诔粢螬鲥尾折叠、双尾