细菌浓度测定

 时间:2024-11-05 16:39:36

在传染病科,以及检验科,对于患者感染的细菌进行培养,并且进行药物敏感实验筛选抗生素水貔藻疽,对于患者的临床治疗意义重大。本经验旨在枞绶晷箜提供一种可靠的对细菌浓度进行检测的方法,用于药物敏感实验,或者实验室进行细菌浓度测定。

工具/原料

紫外分光光度计

石英比色杯

方法/步骤

1、取已经培养好的细菌琼脂平板,加入2ml新鲜的生理盐水,用L棒轻轻将菌落刮下,收集在1.5mlEP管中。

细菌浓度测定

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2、取10μl菌液涂布在载玻片上,干燥固定后进行格兰染色鉴定。

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3、将EP管置于离心机,5000RPM离心5min。

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4、弃上清,取1ml完全无抗1640培养基重悬细菌;取新的1.5mlEP管,加入950μl生理盐水,及50μl菌液,混匀(稀释20倍)。

5、在分光光度计上测定OD值:以生理盐水作为空白对照调零,测定稀释20倍的菌液的吸光度水貔藻疽,若OD值在0.3-0.7的范围内,则按阖嚏逵藩照1OD=1.0×109CFU/ml计算原始菌液浓度。若OD值大于0.7且小于1,则取原始菌液进行40倍稀释后测定吸光度值。若OD值小于0.3,则取原始菌液进行10倍或5倍稀释后测定吸光度值。务必将OD值调整到0.3-0.7的范围内。

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